1. 篩(預(yù))選
(1)將大鼠放入Y-迷宮箱中適應(yīng)3~5min后,給予適當(dāng)電擊至其對3臂均探索進(jìn)入為止。選擇活躍,對電擊反應(yīng)較敏感,逃避反應(yīng)迅速者供測試用。淘汰反應(yīng)過于遲鈍或特別敏感的大鼠。
(2)預(yù)選出達(dá)到電擊次數(shù)≤3次時連續(xù)2次正確反應(yīng)的動物,即對電擊反應(yīng)較敏感的大鼠供實(shí)驗(yàn)用。
(3)在上述初步篩選的基礎(chǔ)上,通過正式迷宮訓(xùn)練,淘汰達(dá)不到學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)(學(xué)不會)的大鼠。
2. 正誤判定的標(biāo)準(zhǔn)
大鼠受電擊后從起步區(qū)直接逃到**區(qū)或通電后10s內(nèi)一次性跑向**區(qū)為“正確反應(yīng)”,若逃到無燈光的任何另一臂,則記為錯誤反應(yīng)。
3. 達(dá)標(biāo)(學(xué)會)標(biāo)準(zhǔn)
(1)連續(xù)10次中有9次或以上正確反應(yīng)(正確反應(yīng)率≥90%)定為學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)。
(2)每個實(shí)驗(yàn)日進(jìn)行20次訓(xùn)練測試,錯誤反應(yīng)次數(shù)(errors number EN)≤2次。全天總反應(yīng)時間(total reaction time TRT)≤120s作為判定大鼠學(xué)會的標(biāo)準(zhǔn)。因?yàn)镋N反映大鼠反應(yīng)的正確程度,TRT反映大鼠反應(yīng)時間的長短,可綜合評價大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力,因而此標(biāo)準(zhǔn)更為合理。
以上為每只大鼠達(dá)標(biāo)(學(xué)會)標(biāo)準(zhǔn),全組大鼠達(dá)標(biāo)(學(xué)會)標(biāo)準(zhǔn)為全組正確率(學(xué)會動物數(shù)/該組動物總數(shù)×100%)達(dá)85%以上。
4. 學(xué)習(xí)測試
實(shí)驗(yàn)時先將大鼠放入迷宮中適應(yīng)3~5min,然后再開始正式實(shí)驗(yàn)。
(1)隨機(jī)休息法:**區(qū)以無規(guī)則次序變換,以訓(xùn)練大鼠辨別燈光刺激及**方位的能力,大鼠受電擊后逃到**區(qū)后,燈光繼續(xù)作用10~15s,熄燈后結(jié)束一次測試,大鼠所在支臂就作為下一次測試的起點(diǎn),兩次測試時間間隔為30s或休息1min 后再予以第2次測試,依次重復(fù),測試至達(dá)連續(xù)9/10標(biāo)準(zhǔn)。
(2)隨機(jī)不休息法:**區(qū)以無規(guī)則的次序變換開始時,對大白鼠所在支臂與另一支臂通電,動物在電擊下逃竄至燈光區(qū)后再保持l0s或30s為一次測試。然后動物所在支臂為下次測試的起始位置進(jìn)行下一次測試。
(3)順序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂輪流作為起步區(qū)或**區(qū)。
以上方法還可以分為兩類:①每天固定訓(xùn)練次數(shù),一般是20次,連續(xù)訓(xùn)練3~4d。大鼠一般都能達(dá)到學(xué)會標(biāo)準(zhǔn)。②不固定訓(xùn)練次數(shù),采用分段連續(xù)訓(xùn)練法,即每訓(xùn)練10次,休息1min,連續(xù)訓(xùn)練直到學(xué)會為止,訓(xùn)練在1d內(nèi)完成。一般多采用**種方法。
5. 記憶保持(再現(xiàn))測試
學(xué)習(xí)測試24h、48h、1周、30d后,再以同樣方法測試至9/10標(biāo)準(zhǔn),正確反應(yīng)次數(shù)定為A,以A/10表示記憶的保持能力,此值越高說明記憶力越好。
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