摘要: 目的 探討電針對創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙( PTSD) 大鼠體重和空間學(xué)習(xí)記憶的影響。方法 將 25 只雄性健康 SD 大鼠隨機(jī)分為模型組、模型西藥組、模型電針組、電針對照組、正常對照組等 5 組，每組各 5 只( 群養(yǎng)) 。造模成功后給予不同處理，**結(jié)束后稱量每只大鼠體重，并采用 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果 與模型組比較，模型電針組、模型西藥組體重明顯增加，在水迷宮內(nèi)尋找平臺(tái)逃避潛伏期明顯縮短，在第 III 象限游動(dòng)時(shí)間比例上升并在該象限穿越次數(shù)明顯增多，且兩組之間各項(xiàng)指標(biāo)并無顯著差異; 而電針對照組與正常對照組各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著。結(jié)論 電針**可明顯改善 PTSD 大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力，并對 PTSD 大鼠體重有較好調(diào)整作用。

關(guān)鍵詞: 創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙; 電針; 體重; 空間學(xué)習(xí)記憶; Morris水迷宮

創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙( post － traumatic stress disorder，PTSD) 是指機(jī)體在異乎尋常的威脅或?yàn)?zāi)難后延遲出現(xiàn)并長期維持的精神障礙，臨床主要表現(xiàn)為病理性重現(xiàn)、持續(xù)警覺性增高、持續(xù)回避、對創(chuàng)傷性經(jīng)歷的選擇性遺忘等。本實(shí)驗(yàn)采用與人類 PTSD的發(fā)生和發(fā)展機(jī)理更為接近的 PTSD 模型探討電針對 PTSD 大鼠體重和空間學(xué)習(xí)記憶的影響。電針對大鼠體重和空間學(xué)習(xí)記憶的影響

1 材料與方法

1. 1 材料

西藥鹽酸帕羅西汀由浙江華海藥業(yè)股份有限公司提供。Morris水迷宮購自上海欣軟信息科技有限公司，由圓形不銹鋼制水池和圓柱形鐵制平臺(tái)兩部分組成: 水池直徑180 cm，高50 cm，池壁漆成黑色，平臺(tái)高 28 cm，直徑 10 cm。LH201 型電針儀購自北京華衛(wèi)產(chǎn)業(yè)開發(fā)公司。電子動(dòng)物秤由電針對大鼠體重和空間學(xué)習(xí)記憶的影響Electronic Balance Precision Instrument 提供。

1. 2 方法

1. 2. 1 動(dòng)物分組和 PTSD 模型的建立: 選取雄性健康 SD 大鼠25 只，清潔級(jí)，體重相當(dāng)，均為 180 ～ 220 g( 大鼠及飼料購自黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào): 黑動(dòng)字第 P00701109) 。隨機(jī)分為模型組、模型西藥組、模型電針組、電針對照組、正常對照組 5 組，每組各 5 只( 群養(yǎng)) 。大鼠在動(dòng)物室適應(yīng) 1 周后，除電針對照組和正常對照組外均接受相同的應(yīng)激刺激: 將大鼠束縛2 h后，立即強(qiáng)迫游泳20 min( 水深50 cm，直徑20 cm，玻璃缸裝滿2/3，水溫 25℃) ; 恢復(fù)15 min，用乙醚麻醉至大鼠意識(shí)喪失，放于通風(fēng)處待其自然蘇醒，之后對其足底施以不可逃避電刺激( 48 V) 10 s。造模結(jié)束后將大鼠放入籠中常規(guī)喂養(yǎng)。

1. 2. 2 **方法: 造模后第4 d即開始對 5 組實(shí)驗(yàn)大鼠進(jìn)行不同處理: ( 1) 模型組和正常對照組不予干預(yù)，常規(guī)喂養(yǎng); ( 2) 模型西藥組在其飲用水中加入規(guī)定劑量的鹽酸帕羅西汀緩釋片( 加入前研末并搖勻至充分溶解) ; ( 3) 模型電針組和電針對照組進(jìn)行電針**，每日 18: 00 開始固定大鼠，參照《實(shí)驗(yàn)針灸學(xué)》的動(dòng)物穴位圖譜定位，選“百會(huì)”、“大椎”穴進(jìn)行針刺，“百會(huì)”平刺、“大椎”斜刺，進(jìn)針深度 0. 5 寸，針柄接電針儀，( 正極在上，負(fù)極在下) 選用連續(xù)波，頻率為2 Hz，刺激強(qiáng)度以大鼠頭部輕微抖動(dòng)為宜，1 次/d，20 min/次，共針刺10 d。為盡量減少誤差，模型組、正常對照組、模型西藥組均于每日 18: 00 進(jìn)行與模型電針組、電針對照組相同的固定，但不給予電針**。

1. 2. 3 檢測方法: ( 1) 體重測量: 分別于**前、后用電子動(dòng)物秤稱量并記錄各組大鼠體重。( 2) Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn): 于造模后第2 d開始進(jìn)行，一共進(jìn)行3 d。將水池按順時(shí)針方向劃分為I、II、III、IV 等 4 個(gè)象限，平臺(tái)放于第 III 象限中央。池內(nèi)注入自來水，水面超過平臺(tái)2 cm，水溫恒定在( 25 ± 1. 0) ℃，水中加入適量食用黑色素染黑以增強(qiáng)對比度，避免數(shù)據(jù)采集時(shí)出現(xiàn)干擾。水池周圍每個(gè)象限貼一塊白色膠布作為大鼠的視覺線索。迷宮上方安置連接電腦的攝像機(jī)，記錄大鼠的運(yùn)動(dòng)軌跡，并用Morris 水迷宮數(shù)據(jù)采集和分析軟件記錄相關(guān)數(shù)據(jù)和圖像結(jié)果。迷宮和攝像頭外周用黑色遮光幕布，以避免外界環(huán)境干擾。( 3) 定位航行實(shí)驗(yàn): 將大鼠從不同象限面向池壁放入水中，記錄大鼠從入水至發(fā)現(xiàn)并爬上平臺(tái)的時(shí)間( 稱為逃避潛伏期) ，每次訓(xùn)練90 s，于平臺(tái)停留2 s后 1 次記錄結(jié)束。第1 d訓(xùn)練 9 次，第2 d訓(xùn)練 6 次，每 3 次的均值作為 1 次平均訓(xùn)練潛伏期，共得出 5 個(gè)均值，作為大鼠的空間學(xué)習(xí)能力。如在90 s內(nèi)未找到平臺(tái)，則逃避潛伏期記錄為90 s，并引大鼠至平臺(tái)并停留30 s以熟悉平臺(tái)位置。每次訓(xùn)練結(jié)束后，將大鼠擦拭吹干以防狀態(tài)不佳。( 4) 空間探索實(shí)驗(yàn): 第3 d移走平臺(tái)，選任一點(diǎn)將大鼠放入水中90 s，記錄大鼠穿越平臺(tái)所在象限的次數(shù)以及在第 III 象限中停留時(shí)間的百分比，作為大鼠空間記憶能力。

1. 3 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)所得各組數(shù)據(jù)用( X珔 ± S) 表示，用 SPSS17. 0 統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行分析，采用方差分析方法進(jìn)行多組間比較。P ＜0. 05 為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 電針對 PTSD 大鼠體重的影響

與模型組比較，模型電針組、模型西藥組大鼠體重明顯增加; 而電針對照組與正常對照組大鼠體重差異不顯著。

2. 2 電針對 PTSD 大鼠學(xué)習(xí)記憶的影響

與模型組比較，模型電針組、模型西藥組大鼠在水迷宮內(nèi)尋找平臺(tái)逃避潛伏期明顯縮短，空間探索實(shí)驗(yàn)中在第 III 象限游動(dòng)時(shí)間比例上升，并在平臺(tái)所在象限穿越次數(shù)明顯增多; 而電針對照組與正常對照組比較各項(xiàng)指標(biāo)均無明顯差異。

3 討論

PTSD 的概念形成始于戰(zhàn)爭，后經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查顯示，自然災(zāi)害、嚴(yán)重事故、重大流行性**都可引起，嚴(yán)重?fù)p害人類行為、心理、認(rèn)知、精神等功能。就如何防治 PTSD 的發(fā)生，申遠(yuǎn)等總結(jié)了各項(xiàng)研究領(lǐng)域的現(xiàn)有證據(jù)并且提出了 PTSD **指南。帕羅西汀是常用的抗抑郁**，屬于選擇性 5 － 羥色胺再攝取抑制劑( SS － ＲIs) ，臨床上被應(yīng)用于抑郁癥的**并取得良好療效，近年來更被應(yīng)用于 PTSD 的**。陳云春等的實(shí)驗(yàn)研究表明: 較低劑量帕羅西汀預(yù)防 PTSD 的效果明顯較好。本實(shí)驗(yàn)造模成功后采用電針“百會(huì)”、“大椎”穴** PTSD大鼠，試圖為臨床 PTSD 患者開辟一條新的**有效的**道路。**后，采用 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)測試各組大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。研究結(jié)果顯示: 與模型大鼠相比，模型電針組、模型西藥組體重明顯增加，在水迷宮內(nèi)尋找平臺(tái)逃避潛伏期明顯縮短，在第 III 象限游動(dòng)時(shí)間比例上升，并在該象限穿越次數(shù)明顯增多，且兩組之間各項(xiàng)指標(biāo)并無顯著差異; 而電針對照組與正常對照組各項(xiàng)指標(biāo)差異不顯著。楊俊的研究表明，電針“百會(huì)”、“大椎”穴顯著增強(qiáng)了大鼠的學(xué)習(xí)和記憶能力，而一定參數(shù)的電針刺激作用于“百會(huì)”、“大椎”則可改善大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙。百會(huì)與大椎屬督脈穴，“督為陽脈之海”，元神之府，上行入腦。百會(huì)位于顛頂，醒腦益智，屬局部取穴; 大椎為“三陽督脈之會(huì)”，與百會(huì)相配取穴，效果更佳。本實(shí)驗(yàn)與此結(jié)論相一致，有效降低了 PTSD 對大鼠認(rèn)知能力的損害。

4 結(jié)論

PTSD 可以導(dǎo)致大鼠的進(jìn)食狀態(tài)不佳，體重增加量小，學(xué)習(xí)記憶能力下降( P ＜ 0. 05) 。模型電針組大鼠體重增加量明顯多于模型組( P ＜0. 05) ，并且在 Morris 水迷宮得分高于模型組( P ＜0. 05) ，提示電針可以調(diào)整 PTSD 大鼠的食欲，改善其學(xué)習(xí)記憶能力。模型電針組與模型西藥組相比，兩種**方法對PTSD 大鼠體重的增加量和水迷宮實(shí)驗(yàn)的測試得分無顯著性差異( P ＞0. 05) ，提示電針**對于 PTSD 大鼠的體重調(diào)整、學(xué)習(xí)記憶能力的改善作用與西藥相當(dāng)。電針對照組與正常對照組比較，各項(xiàng)指標(biāo)無顯著性差異( P ＞ 0. 05) ，提示電針**對大鼠的創(chuàng)傷性刺激不明顯。