條件性恐懼實驗測試方案
模型的制備:將大鼠放在動物飼養室內適應一周。飼養室內溫度為24±0.5℃,濕度為60%,光:暗周期為12h:12h(光照時間為8:00-20:00),隨機分籠單獨飼養,自由進食、飲水。
A.條件性恐懼的建立:將大鼠分別放入斯金納箱(箱子底部為銅條柵欄,可通電)內,適應2分鐘后再給予單一頻率聲音信號(4.5KHZ,60dB,30S,該聲音由美國Adobe公司的Adobe Audition2.0軟件制作)適應4次(兩次聲音間隔1-4分鐘),然后再給予6次以聲音信號為提示的不可逃避足底電擊(1mA,5s),聲音與電擊同時結束,兩次聲音間隔為1-4分鐘,共28分鐘。動物在被電擊時發生驚叫、驚跳、逃避等,聽到聲音提示時出現慌張、逃避或者僵立行為(除呼吸外無其他運動行為),這樣建成恐懼動物模型(以下簡稱建模)。實驗結束后讓動物在斯金納箱內繼續停留2分鐘后放回飼養籠飼養。每次實驗結束后用90%酒精擦拭箱底,用濕布擦拭箱壁,以避免殘留氣味對后續實驗大鼠的影響。
B.恐懼消退訓練:24h后將已經建立條件性恐懼的動物再次放入斯金納箱內,僅給予聲音信號16次,兩次聲音間隔為1-2分鐘,共24分鐘。恐懼對照組在對應的時間點放進斯金納箱內24分鐘,不進行消退訓練(不給聲音刺激)。
C.條件性恐懼消退保持測試:恐懼對照組和恐懼消退組(注:此時大鼠分為兩組:恐懼消退組和對照組)分別在恐懼消退訓練后的第1、3、7天將大鼠放在訓練箱內,給予5次聲音信號,時間間隔為0.5s,記錄3分鐘內的不僵立時間,計算3分鐘內不僵立時間百分比,作為消退保持成績。百分比越高,表明消退保持成績越好。
需要記錄的實驗測試指標:
附:XR-XC404型恐懼記憶實驗系統