高架十字迷宮與焦慮行為的關(guān)系

探討慢性精神應(yīng)激對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的影響及與焦慮行為的關(guān)系。

方法　將38只SD大鼠按照隨機(jī)數(shù)字表隨機(jī)分為精神應(yīng)激組( 30只)和對(duì)照組( 8只) 。對(duì)應(yīng)激組采用限制應(yīng)激和飲水沖突應(yīng)激,持續(xù)2個(gè)月;分別于應(yīng)激前、應(yīng)激后1, 2個(gè)月用空?qǐng)鰧?shí)驗(yàn)和高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)觀察大鼠焦慮水平,計(jì)算出中央格爬行次數(shù)、外周格爬行次數(shù)、開放臂進(jìn)入次數(shù)及停留時(shí)間、閉合臂進(jìn)入次數(shù)及停留時(shí)間。以**組化方法測(cè)定主動(dòng)脈血管局部增殖細(xì)胞核抗原( PCNA)表達(dá),并用蘇木素-伊紅染色法觀察主動(dòng)脈結(jié)構(gòu)變化。

結(jié)果　(1)與對(duì)照組比較,應(yīng)激1個(gè)月后,應(yīng)激組大鼠在開放臂的次數(shù)和時(shí)間、閉合臂的次數(shù)少( P < 0105) ,閉合臂的時(shí)間多(均P < 0101) ;應(yīng)激2個(gè)月后,應(yīng)激組大鼠在外周格爬行的個(gè)數(shù)和閉合臂時(shí)間多( P < 0101) ,開放臂時(shí)間少( P < 0101) 。(2)應(yīng)激組大鼠主動(dòng)脈失去原有的正常結(jié)構(gòu),中層血管平滑肌細(xì)胞排列紊亂,數(shù)目增多。(3)應(yīng)激組大鼠血管壁PCNA表達(dá)的陽性細(xì)胞數(shù)為( 16 485 ±10 694)個(gè)/mm2 ,對(duì)照組大鼠為( 4 012 ±2 256)個(gè)/mm2 , t = 41359, P <0101。(4)中度焦慮組大鼠PCNA表達(dá)與大鼠焦慮呈正相關(guān)( Pearson相關(guān)系數(shù)為01718, P = 01004) 。

結(jié)論　大鼠中度焦慮時(shí),其血管平滑肌細(xì)胞增殖率與焦慮情緒呈正相關(guān)。

實(shí)驗(yàn)方法

精神應(yīng)激方法:為隨機(jī)給予飲水沖突應(yīng)激和限制應(yīng)激兩種應(yīng)激方式。飲水沖突應(yīng)激是根據(jù)Vogel等沖突模型和Geller等[ 9 ]沖突模型設(shè)計(jì)而成。操作箱為標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼養(yǎng)籠,將電腦時(shí)控儀和實(shí)驗(yàn)組的飼養(yǎng)籠聯(lián)結(jié)成電流環(huán)路,電壓36 V,隨機(jī)設(shè)定電腦時(shí)控儀的程序。當(dāng)大鼠飲水時(shí)因電路接通而會(huì)受到電擊;不飲水則電路不通,不會(huì)有電擊,由此造成飲水沖突應(yīng)激。通過電腦時(shí)控儀任意設(shè)定電擊時(shí)間,每天的通電時(shí)間不同(如周一上午8: 00—9: 00為通電時(shí)間,間隔40 min,再設(shè)定9: 40—11: 00為通電時(shí)間,再間隔30 min,如此循環(huán)) ,總的通電時(shí)間不超過20 h;因此大鼠無法預(yù)測(cè)何時(shí)會(huì)有電擊。限制應(yīng)激是將大鼠限制在一狹小的容器中(自制一塑料瓶,直徑7 cm,長(zhǎng)25 cm,一端敞小口,一端為活動(dòng)式的大口) ,在此容器中,大鼠可以翻滾身體,但不能前后左右運(yùn)動(dòng)。在飲水沖突應(yīng)激的前提下,再加上限制應(yīng)激每周隨機(jī)進(jìn)行2次,每次持續(xù)時(shí)間不等。兩種應(yīng)激共持續(xù)60 d。

動(dòng)物行為學(xué)評(píng)定:分別于應(yīng)激前、應(yīng)激后1個(gè)月、2個(gè)月時(shí)進(jìn)行評(píng)定。(1)開場(chǎng)試驗(yàn) ,用一

100 cm ×100 cm ×100 cm木制箱,底板有25個(gè)20cm ×20 cm的方格,沿墻沿稱外周格,其余為中央格。將大鼠放在正中央格,觀察其在中央格和外周格爬行次數(shù),共5 min。以大鼠的三爪以上跨入鄰格計(jì)數(shù)。計(jì)算爬行的總格數(shù)、中央格爬行次數(shù)占爬行總格數(shù)的比例。因中央格爬行次數(shù)與大鼠的焦慮行為呈反比,中央格爬行次數(shù)少,表明大鼠很焦慮。

(2)高架十字迷宮實(shí)驗(yàn) ,實(shí)驗(yàn)裝置由兩條相對(duì)開臂(50 cm ×10 cm ×10 cm)和兩條相對(duì)閉臂(50 cm ×10 cm ×10 cm)及中央?yún)^(qū)(10 cm ×10 cm)連接而成,距離地面50 cm?？?qǐng)鰧?shí)驗(yàn)結(jié)束后將大鼠從中央?yún)^(qū)面向閉臂放入,分別觀察其在開放臂和閉合臂的進(jìn)入次數(shù)及停留時(shí)間,共5 min。因開放臂進(jìn)入次數(shù)及停留時(shí)間與大鼠的焦慮情緒呈負(fù)相關(guān),進(jìn)入開放臂次數(shù)越少,停留時(shí)間越短,說明大鼠的焦慮情緒越嚴(yán)重。

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