【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/font>
1. 了解Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)(Morris Water Maze)的原理。
2. 掌握Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)方法。
3. 掌握Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)及其分析。
【實(shí)驗(yàn)原理】
通過觀察并記錄動(dòng)物學(xué)會(huì)在水箱內(nèi)游泳并找到藏在水下逃避平臺(tái)所需的時(shí)間、采用的策略和它們的游泳軌跡,分析和推斷動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶和空間認(rèn)知等方面的能力。它能比較客觀地衡量動(dòng)物空間記憶(spatial memory),工作記憶(working memory)以及空間辨別能力(spatial discriminability)的改變。
【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】
大鼠、小鼠。
【實(shí)驗(yàn)器材】
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)由圓形水池、圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng)組成。圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng)主要由攝像機(jī)、計(jì)算機(jī)、圖像監(jiān)視器組成,動(dòng)物入水后啟動(dòng)監(jiān)測(cè)裝置,記錄動(dòng)物運(yùn)動(dòng)軌跡,實(shí)驗(yàn)完畢自動(dòng)分析報(bào)告相關(guān)參數(shù)。
1. Morris水迷宮圓形水池 為一圓形ABS工程塑料水桶,直徑為100cm,高為50~60cm,水池水深為30~40cm,一個(gè)圓形平臺(tái)直徑為9cm,藏匿于2cm的水面之下。水池的內(nèi)部不得有任何標(biāo)記,水中加入適量的新鮮牛奶或奶粉,使水池成為不透明的乳白色。在圓桶的上緣等距離地設(shè)東、南、西和北4個(gè)標(biāo)記點(diǎn),作為動(dòng)物進(jìn)水池的入水點(diǎn),以這4個(gè)入水點(diǎn)在水面和水桶底部的投影點(diǎn),將水面和水桶部分均等的分為4個(gè)象限。按實(shí)驗(yàn)要求,可任意地將平臺(tái)設(shè)置于某一象限的中間。適當(dāng)?shù)暮銣卦O(shè)備使水溫保持在23~25℃。水迷宮水池應(yīng)配有良好的注水和排水設(shè)備,水池的位置一旦確定,就不要輕易變動(dòng),尤其在同一輪水迷宮的測(cè)試中。
2. 水迷宮圖像自動(dòng)采集和處理系統(tǒng) 能自動(dòng)地采集動(dòng)物的入水位置、游泳的速度、搜索目標(biāo)的所需時(shí)間、運(yùn)行軌跡和搜索策略等參數(shù),并可對(duì)所采集的各種數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析。設(shè)備受限制的實(shí)驗(yàn)室,仍可沿用當(dāng)今西方國家不少實(shí)驗(yàn)室所采用的人工記錄方法。
【實(shí)驗(yàn)方法與步驟】
實(shí)驗(yàn)訓(xùn)練階段連續(xù)進(jìn)行3d,每天訓(xùn)練4次。訓(xùn)練時(shí),將大鼠面向池壁從四個(gè)入水點(diǎn)分別放入水池,記錄大鼠從入水到找到水下隱蔽平臺(tái)并站立于其上所需時(shí)間,作為潛伏期,用秒(s)表示,大鼠找到平臺(tái)后,讓其在平臺(tái)上站立10s。若入水后60s大鼠未能找到平臺(tái),則將其輕輕從水中拖上平臺(tái),并停留10s,然后進(jìn)行下一次訓(xùn)練。每只大鼠從四個(gè)入水點(diǎn)分別放入水池為一次訓(xùn)練,兩次訓(xùn)練之間間隔30s。
【實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目】
1. 定位航行實(shí)驗(yàn)(place navigation) 用于測(cè)量大鼠對(duì)水迷宮學(xué)習(xí)和記憶的獲取能力。實(shí)驗(yàn)觀察和記錄大鼠尋找并爬上平臺(tái)的路線圖及所需時(shí)間,即記錄其潛伏期。
2. 空間搜索實(shí)驗(yàn)(spatial probe test) 用于測(cè)量大鼠學(xué)會(huì)尋找平臺(tái)后,對(duì)平臺(tái)空間位置記憶的保持能力。定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,撤去平臺(tái),從同一個(gè)入水點(diǎn)放入水中,測(cè)其**次到達(dá)原平臺(tái)位置的時(shí)間、穿越原平臺(tái)的次數(shù)。
3. 空間辨別能力實(shí)驗(yàn)(spatial discriminability) 即雙平臺(tái)實(shí)驗(yàn),用于測(cè)量大鼠的“空間辨別能力”。在水迷宮中設(shè)置兩個(gè)外觀完全一致(排除“視覺辨別”),但位置不同(空間差異)的可見平臺(tái)。其中一個(gè)平臺(tái)不會(huì)沉沒(**平臺(tái)),另一個(gè)平臺(tái)一觸即下沉(偽**平臺(tái))。記錄大鼠的“正確反應(yīng)次數(shù)”,即在一定的實(shí)驗(yàn)次數(shù)中,大鼠不接觸偽**平臺(tái)而到達(dá)**平臺(tái)的次數(shù)。顯然,“正確反應(yīng)次數(shù)”越高,“空間辨別”能力越好。
【注意事項(xiàng)】
1. 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的環(huán)境和實(shí)驗(yàn)者的位置都可作為大鼠搜索目標(biāo)時(shí)的參照物,因此,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)備和實(shí)驗(yàn)者的位置應(yīng)相對(duì)固定。
2. 水迷宮實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)保持安靜,光線柔和而均勻。
【評(píng)價(jià)】
Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)是一種讓實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)習(xí)在水中尋找隱藏平臺(tái)并通過分析其尋找平臺(tái)所用時(shí)間和所走路徑判斷其記憶功能的一種實(shí)驗(yàn)方法。是研究空間學(xué)習(xí)記憶的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)。Morris水迷宮不僅用于研究與空間學(xué)習(xí)記憶相關(guān)的腦區(qū)功能評(píng)價(jià),而且可用于研究與之相關(guān)的**效果、環(huán)境、基因、電磁輻射等對(duì)學(xué)習(xí)記憶影響的評(píng)價(jià)。操作簡便,方法可靠。