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**行為及條件性行為敏感化效應及其個體差異
**行為及條件性行為敏感化效應及其個體差異
摘　要　目的:考察**處理下,大鼠行為敏感化及條件性行為敏感化效應及其個體差異性表現(xiàn)。方法:根據(jù)大鼠在初次抵達的新穎環(huán)境中水平活動量的高低,將大鼠劃分為高反應大鼠(High responder, HR)和低反應大鼠(Lowresponder, LR)。應用自動監(jiān)測大鼠活動箱,分別考察HR和LR大鼠在行為及條件性行為敏感化效應形成及表達上的差異。結(jié)果: (1)連續(xù)5天**給藥,LR大鼠活動量顯著升高, HR大鼠無此效應; (2)條件測試日(第6天) ,給藥與環(huán)境匹配大鼠,活動量較給藥與環(huán)境非匹配組動物和對照組動物顯著為高;此效應在HR和LR大鼠同時存在; (3)從給予**到給予鹽水LR大鼠活動量顯著下降,而HR大鼠活動量無顯著改變。結(jié)論:在連續(xù)給藥下,LR大鼠較HR大鼠,在行為敏感化效應的形成中,具有更為顯著的效應,此效應為LR動物對**更高的**效應,而非條件效應所致。同時HR和LR大鼠都可以對**條件性線索產(chǎn)生應答,產(chǎn)生條件性行為敏感化效應。
關鍵詞　**,行為敏感化,條件性行為敏感化,個體差異。
1　引言
　　行為敏感化是成癮的重要行為反應,表現(xiàn)為在重復給藥下,動物表現(xiàn)出越來越高的精神興奮性運動效應,這種越來越高的精神興奮性效應的基礎是腦內(nèi)長時程的神經(jīng)適應性改變(neuroadapta2tion),這種改變被認為是產(chǎn)生**依賴和依賴后復吸的生物學基礎。
　　應用***、****、**、酒精等成癮**對大鼠進行重復給藥處理,可以導致動物出現(xiàn)行為敏感化效應,甚至在前處理(pretreatment)中只對動物進行一次性給藥處理,動物在三周之后,依然可以出現(xiàn)行為敏感化效應并伴隨以相應的腦內(nèi)生化改變,例如在伏隔核(NucleusAccumbens, NAC)出現(xiàn)多巴胺(dopamine, DA)和乙酰膽堿神經(jīng)元的持續(xù)高反應性。
　　在**成癮研究領域一個引人注目的事實是成癮行為效應的個體差異。給予動物同樣的**處理,應用不同的行為學模型,例如自我給藥模型(Self- administration, SA)
,條件性位置偏愛模型(Conditionedplacepreference, CPP),精神運動興奮性模型(Locomotor activity, LA)等,都可以發(fā)現(xiàn)個體差異性的表現(xiàn)。
　　在以往關于行為敏感化及其個體差異的研究中,應用**進行行為敏感化個體差異研究的報告有限,而應用**進行條件性行為敏感化效應個體差異的研究目前還未見報道。同時以往應用精神興奮劑進行的研究結(jié)果也呈現(xiàn)出一定的變異。例如Hooks等人發(fā)現(xiàn),通過動物在初次抵達的新穎環(huán)境中水平活動量的高低篩查出的高反應大鼠(High
responders, HR)比低反應大鼠(Low responders,LR)對****(AMPH)有著更為強烈的行為敏感化效應。但是也有研究者發(fā)現(xiàn),LR大鼠的行為敏感化效應更高。值得注意的是,上述研究結(jié)果都是在連續(xù)地給藥與環(huán)境相匹配的情況下獲得的,而在連續(xù)給藥和環(huán)境相匹配的情況下,動物較高的活動性可能同時存在著對**的無條件效應和因給藥
與環(huán)境匹配而產(chǎn)生的激動性條件反射的成分。實驗在連續(xù)5天給予**的情況下,在第6天給予動物鹽水,考察動物活動性的改變,以確定先天特征不同的大鼠,其對**和對給藥相關線索是否存在著差異性反應。考慮到**類**在亞洲的濫用,其成癮機制和精神興奮劑的不同,以及**類**在臨床上使用的一定的必要性,我們選擇**作為研究使用的**。
　　研究有下列三個主要研究目的: (1)考察在行為敏感化建立的過程中,具有先天不同運動特征的HR和LR大鼠的行為敏感化效應; (2)考察**誘導的條件性行為敏感化行為的表達及此效應在HR和LR大鼠間的異同; (3)考察HR和LR大鼠對**及**相關條件線索反應的異同。
　　多數(shù)研究者認為有**接觸史的動物或人,在納絡酮催癮情況下,或者在自然戒斷情況下出現(xiàn)軀體戒斷癥狀,可被視為形成軀體依賴。在本實驗所應用的成癮**劑量及時程下,在所有時點及自然戒斷情況下,均未出現(xiàn)軀體戒斷癥狀,因此可以認為,本實驗中接觸成癮**的動物并未形成軀體依賴狀態(tài)。
2　材料和方法
2. 1　實驗動物及藥品
　　實驗動物為雄性SD大鼠43只,起始體重400～480克(中國科學院遺傳研究所實驗動物中心提供; 許可證號: 199036)。動物在50cm(長) ×2215cm(寬) ×30cm(高)的不銹鋼籠中群居飼養(yǎng),每箱8只動物,自由飲水進食。光周期為8∶00(開)～20∶00(關),實驗在光周期完成(10∶00～18∶00)。實驗室溫度控制在20～22℃,相對濕度為40%左
右。正式實驗開始前,提前3天使動物適應實驗主試人員的實驗操作,排除非實驗特異性的應激因素。鹽酸**(Morphine HCL)由青海制藥廠提供,生理鹽水溶解,腹腔注射給藥(i. p. ),劑量為5mg/kg,**溶液及鹽水注射容量全部為1ml/kg。
2. 2　實驗裝置及程序
2. 2. 1　大鼠在新穎環(huán)境中活動量測定　采用40cm(長) ×40cm(寬) ×35cm(高)的黑色有機玻璃運動箱進行大鼠精神興奮性運動行為的測定。箱體四壁為磨砂面,底板為大小為1cm×1cm的柵格底面。動物在動物房適應1周。正式實驗開始后,將動物置于**進入的運動箱中,考察大鼠在60分鐘內(nèi)的自發(fā)活動量(根據(jù)攝像頭與監(jiān)測箱的距離和監(jiān)
測視野大小計算,每4個像素為1cm,以下皆以像素數(shù)計算動物活動量)。根據(jù)此活動量,將高于和低于活動量中位數(shù)的50%大鼠定義為高運動性大鼠(HR)和低運動性大鼠(LR)。上述將動物按照50%為界,定義為HR和LR大鼠,并研究動物此種先天行為特征及其個體差異與成癮行為效應關系的分類方法,已得到多數(shù)研究者的認可。
2. 2. 2　大鼠行為敏感化及條件性行為敏感化測定裝置同“大鼠在新穎環(huán)境中活動量測定裝置”。測定分為行為敏感化形成的測試階段和條件性行為敏感化形成的測試階段。將HR和LR大鼠各分為3組,就給予**和環(huán)境是否匹配,將動物分成6組,分別為HR_匹配組(n=6),LR_匹配組(n=7),HR_非匹配組(n=7),LR_非匹配組(n=7), HR_對
照組(n=8),LR_對照組(n=8)。
　　正式實驗開始后,從第1天到第5天為行為敏感化測試階段。對于匹配組動物,每天上午10點,在測試箱中給予**,測試其60分鐘內(nèi)的活動量。晚8點,匹配組動物在動物房飼養(yǎng)籠中給予鹽水。對于非匹配組動物,上午10點在測試活動箱中給予鹽水,測試其60分鐘內(nèi)的活動量。晚8點,在動物房飼養(yǎng)籠中給予**。對照組動物,上午10點在測試活動箱中給予鹽水,測試動物在60分鐘內(nèi)的活動量。晚8點,動物在動物房飼養(yǎng)籠中給予鹽水。
　　實驗第6天, 6組動物分別給予和訓練階段相同容量的生理鹽水注射,測試大鼠在60分鐘內(nèi)在測試箱中的活動量,此活動量為動物條件性行為敏感化的表達。
2. 3　數(shù)據(jù)統(tǒng)計
　　應用two- wayANOVA重復測量方式統(tǒng)計HR和LR匹配大鼠在連續(xù)測量下形成的行為敏感化效應,應用此統(tǒng)計方法考察從第1天到第2天給藥,從第5天給予**到第6天給予鹽水引起的動物活動量的改變。應用單變量方差分析(one- wayANO2VA)方式考察在條件測試日(第6天)橫斷面上,匹配組、非匹配組、對照組動物的精神興奮性差異。應
用單變量方差分析(one- wayANOVA)方式,統(tǒng)計在條件測試日(第6天)橫斷面上,在HR和LR內(nèi)部,匹配、非匹配、對照組動物的精神興奮性運動的差異。

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