震驚條件反射實驗方法
1、 基本原理:震驚反射是哺乳動物對外界刺激自然產(chǎn)生的簡單行為反應(yīng),也是評價動物反應(yīng)性的一個敏感指標(biāo)。它包括始于頭部和尾巴的一些列快速運動:隨著聲音刺激的產(chǎn)生和增強,動物主要肌群出現(xiàn)收縮和舒張。抗焦慮的**使這種反應(yīng)減弱、幅度降低,致焦慮劑則相反。
2、 PPI(前脈沖抑制):短暫而強烈(一般大于80dB)的聽覺刺激可以引起震驚反射。在強的震驚反射刺激出現(xiàn)之前20~500ms內(nèi)對實驗動物施加一個本身不能引起震驚反射的聲音刺激,可以將震驚的幅度減小80%。這種在強烈的震驚反射刺激出現(xiàn)前的一段時間內(nèi)出現(xiàn)的若感覺刺激對震驚反射的抑制作用就叫做PPI。
3、 PPI測試通常使用聽覺刺激模式,通常采用爆破白噪音,常用刺激序列如下:每一輪刺激剛開始時讓受試對象適應(yīng)一定強度的背景噪音,且持續(xù)在整個實驗過程中,首先給予僅有強刺激的小實驗,然后給出弱刺激與強刺激為不同時間間隔的一系列小實驗,小實驗順序以隨機方式給出,每兩個小實驗之間的時間間隔為8~30s或更長(通常為15~20s),以便后面的刺激是作為新奇刺激出現(xiàn)的,避免了前面刺激產(chǎn)生的不應(yīng)期對后面刺激的影響,而且隨機變化的實驗間隔時間較固定間隔更少出現(xiàn)驚跳反射的適應(yīng)性。
4、 為保證聲音刺激和實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,設(shè)備應(yīng)配備標(biāo)準(zhǔn)儀器,在每次實驗前用標(biāo)準(zhǔn)儀器對設(shè)備進行校準(zhǔn)。
范例一:
簡介:用雄性的wistar大鼠,體重約200g,實驗用一個特制的裝置,包括:
(1) 數(shù)個敞開的籠子(8cm*8cm*16cm);
(2) 一個隔音箱,內(nèi)有四個平臺,并裝有一排風(fēng)扇,可給箱內(nèi)提供50dB(SPL)的噪聲。箱頂部離動物14cm高處有一個揚聲器產(chǎn)生白噪聲;
(3) 應(yīng)變計(strain gauge);
(4) 電腦
實驗流程:
將大鼠單個放入籠內(nèi),籠可限制大鼠運動,但不固定大鼠。然后將籠置于隔音箱平臺,使大鼠安靜地適應(yīng)5min。
聲音刺激由98dB和120dB(持續(xù)20ms)的突發(fā)噪聲組成。每一聲刺激產(chǎn)生的同時,測定200ms內(nèi)大鼠的反應(yīng)。
通過應(yīng)變計測定大鼠在籠內(nèi)的軀體運動,以電壓變化表示,并經(jīng)過數(shù)字模擬轉(zhuǎn)換為重量(g)變化,計算機自動記錄數(shù)據(jù)。刺激后200ms的*大重量變化為
震驚峰值,同一刺激重復(fù)12次得出
平均峰值。一個實驗間期包括每個刺激強度隨機重復(fù)12次,刺激間隔為20~40s(隨機出現(xiàn))。實驗前測一次作為對照值,結(jié)果用給藥后的測定值占給藥前值的百分比表示。
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范例二:Spontaneous Nicotine Withdrawal Potentiates the Effects of Stress in Rats
流程:分為兩個獨立的階段(session)
1、 大鼠置于震驚籠,在昏暗條件下安靜地適應(yīng)5min,
2、 然后大鼠實施30次震驚刺激,90、95和105dB分別10次(?),平均刺激間隔時間30s,偽隨機順序(pseudorandom),黑暗環(huán)境,為**階段震驚實驗。
3、 隨后大鼠被從實驗籠中取出再置于飼養(yǎng)籠中,也是暗環(huán)境安靜適應(yīng)5min或15min。
4、 然后大鼠重新放入震驚籠中,準(zhǔn)備**階段的實驗
5、 **階段的實驗與**階段完全一致,除了一個是在暗環(huán)境下,一個是在明亮環(huán)境下
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